PEG-DBCO（聚乙二醇-二苯并环辛炔）是一种常用的生物偶联试剂，DBCO基团可与叠氮基团发生环张力驱动的SPAAC（应变促进叠氮-炔环加成）反应，无需铜催化剂即可在生理条件下快速完成偶联。PEG间隔臂的引入不仅提高水溶性，还能减少生物分子间的空间位阻，是ADC药物 linker、荧光标记、生物探针构建的理想选择。

产品参数

核心技术原理：DBCO点击化学

DBCO（二苯并环辛炔）是一种环张力炔烃，其三元环结构蕴含较高的环张力能。当DBCO与叠氮基团（-N₃）接近时，环张力驱动两者发生SPAAC（Strain-Promoted Azide-Alkyne Cycloaddition，应变促进叠氮-炔环加成）反应，无需铜催化剂即可在常温常压下快速生成稳定的三唑环连接体。

反应特点：

• ✅ 无需金属催化剂：避免铜离子对敏感生物分子的破坏，适用于蛋白质、抗体等
• ✅ 快速高效：反应速率常数k可达10³-10⁴ M⁻¹s⁻¹，室温下数分钟至数小时完成
• ✅ 生物相容：在水性缓冲液、血清或细胞培养基中直接反应
• ✅ 高度专一：叠氮与DBCO的反应几乎不与其他官能团干扰

PEG间隔臂的引入可有效减少空间位阻，改善生物分子的水溶性和柔性，提升偶联产物的稳定性。对于需要长循环时间的体内应用（如ADC药物），PEG化还能显著降低网状内皮系统（RES）的清除。

核心应用场景

1. ADC抗体偶联药物 linker

在ADC药物开发中，DBCO-PEG linker常用于将细胞毒素（Payload）与抗体连接。由于反应无需金属催化剂，DBCO点击化学可有效保护抗体的生物活性不受损伤。目前已有多款采用DBCO-PEG linker的ADC药物进入临床试验阶段。

2. 荧光标记与生物成像

将DBCO基团引入荧光染料或荧光蛋白，可通过点击化学实现快速、无铜的荧光标记。这种方法特别适用于活细胞成像、流式细胞术等对细胞活性要求高的实验。

3. 聚糖/糖蛋白标记

天然糖蛋白或细胞表面聚糖可先引入叠氮标记，再与DBCO-PEG探针发生点击反应，实现位点特异性的聚糖分析，常用于糖生物学研究和疾病生物标志物发现。

4. 纳米颗粒表面修饰

DBCO-PEG可用于金纳米颗粒、磁性纳米颗粒或PLGA纳米粒的表面功能化，通过点击化学将靶向配体（如RGD、叶酸、抗体）快速偶联到纳米颗粒表面，构建靶向递送系统。

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实验方案推荐

DBCO-叠氮点击反应标准流程：

1. 叠氮标记：将待偶联分子（如抗体、蛋白）按常规方法引入叠氮基团（使用NHS-酯活化的Azide试剂）
2. DBCO溶液配制：将DBCO-PEG试剂以适当浓度溶于DMSO或缓冲液（建议10-50 mM储存液）
3. 点击反应：将叠氮标记分子与DBCO试剂混合（摩尔比约1:1.5-1:3），室温反应1-4小时
4. 纯化：反应完成后，通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应物
5. 质量检测：通过SDS-PAGE、HPLC或质谱确认偶联效率

常见问题